期刊简介

               本刊凭着对杂志精品意识的执着追求,编辑出版了今天这样一本学术先进、编校规范、印刷装帧独具风格的精品杂志,使它能在广阔的医学期刊领域里,拥有自己的一方天地,特别是在肿瘤学期刊园地里,亨有较高的声誉。                

首页>实用癌症杂志
  • 杂志名称:实用癌症杂志
  • 主管单位:江西省卫生厅
  • 主办单位:江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所
  • 国际刊号:1001-5930
  • 国内刊号:36-1101/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
实用癌症杂志2015年第07期

携带鸡贫血病毒凋亡素基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定

邓守明;蔡召忠

关键词:同源重组, 凋亡素, 腺病毒, 增强绿色荧光蛋白
摘要:目的:构建携带鸡贫血病毒凋亡素 VP3基因的重组腺病毒质粒。方法设计 VP3 cDNA 扩增引物,从PET15b-VP3质粒中扩增 VP3的 DNA 序列,与线性 pShuttle-IRES-hrGFP-2连接,PCR 和 EcoR Ⅴ酶切电泳鉴定;穿梭质粒pShuttle-VP3-EGFP 经 Pmel 酶切线性化后,转化含 pAdeasy-1的超感受态 BJ5183大肠杆菌,细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒 pAd-VP3-EGFP,质粒经 PCR、PacI 酶切电泳及测序鉴定。结果线性化的 pShuttle-VP3-EGFP 转化含pAdeasy-1的超感受态 BJ5183大肠杆菌,重组质粒经酶切获得一大于23 kb 的大片段和4.5 kb 的片段,PCR 反应扩增出了402 bp 的片段,重组质粒测序证实 VP3-EGFP 编码区成功克隆入了腺病毒 pAd 中,且其序列与 GeneBank 中 VP3 CD-NA 序列完全一致。结论用细菌内同源重组法可快速、高效地制备携带凋亡素 VP3基因的重组腺病毒质粒,为深入研究 VP3的抗肿瘤效应及机制奠定了基础。