期刊简介
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首页>实用癌症杂志
- 杂志名称：实用癌症杂志
- 主管单位：江西省卫生厅
- 主办单位：江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所
- 国际刊号：1001-5930
- 国内刊号：36-1101/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
共表达CD40L和IL-2的腺病毒对树突状细胞成熟和IL-12产生的影响
张璇；张玉萍；谭晓华
关键词：CD40配基, 白细胞介素-2, 白细胞介素-12, 5/F35嵌合型腺病毒载体, 树突状细胞
摘要：目的 探讨共表达人CD40L和IL-2的5/F35嵌合型腺病毒载体(Ad5/F35 CD40L-IL-2),对人单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)的感染效率及感染后对Mo-DC表型及IL-12产生的影响.方法 提取人外周血单个核细胞(PBMCs)总RNA,应用RT-PCR方法克隆CD40L和IL-2,构建Ad5/F35 CD40L-IL-2腺病毒载体.分离和培养人Mo-DC后,应用流式细胞仪分析嵌合型腺病毒载体对Mo-DC的感染效率、CD40L基因表达及感染前后Mo-DC表型的变化;采用ELISA法测定Mo-DC培养上清中细胞因子IL-2和IL-12的含量.结果 成功克隆CD40L和IL-2基因并构建成5/F35嵌合型腺病毒载体.Ad5/F35嵌合型腺病毒载体能高效感染Mo-DC,感染效率可达75%以上,Ad5/F35 CD40L-IL-2感染Mo-DC能有效地表达CD40L和分泌IL-2.感染前Mo-DC中CD80、CD86、CD40和HLA-DR呈一定水平表达,而CD83表达水平较低,感染24 h后,CD80、CD86、CD40和HLA-DR表达水平明显上调,特别是CD83.感染不同时间点测定Mo-DC上清IL-12水平,上清中IL-12水平升高呈时间依赖性.结论 Ad5/F35 CD40L-IL-2能高效感染人Mo-DC并表达相应的基因产物,促进Mo-DC成熟和刺激IL-12的分泌.
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