期刊简介

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  • 杂志名称:实用癌症杂志
  • 主管单位:江西省卫生厅
  • 主办单位:江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所
  • 国际刊号:1001-5930
  • 国内刊号:36-1101/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
实用癌症杂志2013年第05期

FASN靶向miRNA干扰质粒的构建及鉴定

曾会龙;罗庆丰;刘志礼;詹名花;张志宏;陈文昭;龙新华

关键词:脂肪酸合成酶, RNA干扰, 骨肉瘤
摘要:目的 构建靶向FASN基因的miRNA表达质粒.方法 根据NCBI查询到的FASN cDNA序列设计并合成靶向FASN的寡聚核苷酸序列,连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体中构建重组质粒(分别命名为X197-1、2、3、4).重组质粒与脂质体2000共转染人骨肉瘤U2-OS细胞,倒置荧光显微镜下观察荧光率.采用RT-PCR和Western blot法检测重组质粒对FASN的mRNA及蛋白表达的影响.结果 质粒(X197-1、X197-2)转染U2-OS骨肉瘤细胞后荧光率高于50%.4种质粒均能抑制FASN表达,其中X197-1、X197-4抑制作用显著.结论 靶向FASN基因的miRNA质粒构建成功.