期刊简介
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首页>实用癌症杂志
- 杂志名称：实用癌症杂志
- 主管单位：江西省卫生厅
- 主办单位：江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所
- 国际刊号：1001-5930
- 国内刊号：36-1101/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
mGM-CSF重组质粒的构建、表达及活性鉴定
洪晓武；窦骏；陈国兵；陈峻崧；赵枫姝
关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子, 重组质粒, 基因治疗
摘要：目的构建pc-mGM-CSF重组质粒载体,为mGM-CSF基因治疗肿瘤的研究奠定基础.方法采用RT-PCR方法从小鼠脾脏中获得目的基因mGM-CSF,克隆于pcDNA3.1/Myc-His(-)(A)质粒上,成为pc-mGM-CSF,用PCR、酶切进行鉴定,然后用脂质体转染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,用G418筛选后通过RT-PCR和SDS-PAGE鉴定,将转染SP2/0上清加入NFS-60细胞,检测蛋白活性.结果重组质粒中含有mGM-CSF基因,在SP2/0中有表达,且表达产物能分泌到肿瘤细胞外,分泌到细胞外的产物用mGM-CSF依赖株NFS-60细胞检测证明具有生物学活性.结论成功构建含mGM-CSF真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用.
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